一、介紹
分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。它的基本原理是建立在光與物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上,當(dāng)光子和溶液中的物質(zhì)分子相碰撞時(shí),就會(huì)發(fā)生吸收,物質(zhì)對(duì)光的吸收是具有選擇性的,通過(guò)測(cè)量其吸光度值的大小可反映某一物質(zhì)存在量的多少。
二、分光光度計(jì)分類。
1. 可見(jiàn)分光光度計(jì)
一種單光束分光光度計(jì),用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度,并對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析的儀器。該儀器廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測(cè)、環(huán)保監(jiān)測(cè)、食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。
2. 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)
用來(lái)測(cè)量樣品對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度,并對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析。該產(chǎn)品的光路可分為單光束,假雙光束和雙光束,目前是使用多、覆蓋面廣的分析儀器之一,在生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、化學(xué)化工等多個(gè)領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。
3. 紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的樣品,具有快速、樣品量少,特征性強(qiáng)、不破壞樣品等特點(diǎn)。
4. 熒光分光光度計(jì)
用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,可應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。
5. 原子吸收分光光度計(jì)
主要適用于樣品中微量及痕量的組分分析,是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
三、組成部分
A、光源
在整個(gè)反映區(qū)域可發(fā)射連續(xù)光譜,具有穩(wěn)定和足夠長(zhǎng)的使用壽命。常用光源有白熾燈(鎢絲燈、鹵鎢燈等) ,氣體放電燈(氫燈、氘燈及氙燈等) ,金屬弧燈(各種汞燈)等??梢?jiàn)光區(qū)主要用鎢燈(320~2500mm)、氙燈(180~375nm)為光源,紫外區(qū)主要用氫、氘燈。
B、單色器
又稱波長(zhǎng)控制器,其作用是將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光,并可從中選出一任波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。來(lái)自光源的光線,可直接通過(guò)單色器的狹縫,照到分光部件上。單色器的主要組件是玻璃棱鏡、復(fù)合濾光片或光柵。
C、樣品室
用于放置各種類型的吸收池(比色皿、比色杯)和相應(yīng)的池架附件,根據(jù)其材質(zhì)可大致分為石英池、玻璃池以及塑料池,用于盛裝待測(cè)溶液和參比溶液。
d. 檢測(cè)器
利用光電效應(yīng),將透過(guò)吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào),并將電信號(hào)放大的裝置。常用的有光電池、光電管或光電倍增管。
E、結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)(顯示器)
將光電管或光電倍增管放大的電流,通過(guò)儀表顯示出來(lái)的裝置,常用的顯示器有檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器和記錄器等,具有自動(dòng)控制和結(jié)果處理的功能。
四、使用注意事項(xiàng)
1、開(kāi)機(jī)時(shí)需預(yù)熱,不使用時(shí),不要點(diǎn)亮
2、請(qǐng)勿拆卸單色器,吸收池使用后應(yīng)立即沖洗干凈,用擦鏡頭紙或柔軟的棉織品擦干水分,謹(jǐn)慎不要?jiǎng)潅?。測(cè)量時(shí)注意不要讓溶液濺入樣品室。盛有溶液的吸收池也不要在樣品室放置太長(zhǎng)時(shí)間。
3、光電器件要避免強(qiáng)光照射、受潮、集塵。檢測(cè)器保存干燥和絕緣性對(duì)儀器壽命有宜。
4、更換分光光度計(jì)光源燈時(shí),盡量不要用手直接接觸燈泡,避免油污粘附。如被油污黏附可以用無(wú)水乙醇擦除。
五、應(yīng)用
1、定性分析中測(cè)試物質(zhì)純度檢測(cè)、未知物的鑒定、分子結(jié)構(gòu)中功能團(tuán)的推測(cè)、同分異構(gòu)體的判別。
2、定量分析中單組分分析、多組分分析、有機(jī)元素分析、無(wú)機(jī)元素分析等。
六、相關(guān)品牌
日本 HITACHI 日立、美國(guó) Agilent 安捷倫、美國(guó) Thermo Fisher 賽默飛世爾、美國(guó) HACH 哈希、美國(guó) PerkinElmer 鉑金埃爾默、METTLER TOLEDO 梅特勒-托利多、美國(guó) BIO-RAD伯樂(lè)、德國(guó) Eppendorf 艾本德、美國(guó) LabTech 萊伯泰科等。其中日本日立、美國(guó)安捷倫的分光光度計(jì)通過(guò)其高靈敏度、測(cè)量精準(zhǔn)、高穩(wěn)定性和操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),贏得了眾多科研人員的青睞。